الایزا ELISA | معرفی تکنیک الایزا
الایزا ELISA | معرفی تکنیک الایزا
الایزا (ELISA) یک آزمایش بیوشیمیایی تحلیلی است که ابتدا توسط Weiland در سال 1978 توصیف شد.این آزمایش با استفاده از آنزیم فاز جامد برای تشخیص حضور لیگاند (معمولا یک پروتئین) در یک نمونه مایع با استفاده از آنتی بادی هایی که علیه پروتئین مورد نظر اندازه گیری می شوند، استفاده می شود.
جهت کسب اطلاعات بیشتر در مورد تست الایزا و کیت های تحقیقاتی الایزا، با شرکت سفیرآزما کیان، فعال در زمینه بیوتکنولوژی و کیت های تحقیقاتی، تماس بگیرید.
الایزا ELISA به عنوان یک ابزار تشخیصی در پزشکی و آسیب شناسی گیاه و به عنوان کنترل کیفیت در صنایع مختلف مورد استفاده قرار گرفته است.
در فرم ساده ی ELISA، آنتی ژن ها از نمونه به یک سطح متصل می شوند. سپس، یک آنتی بادی تطبیقی بر روی سطح اعمال می شود تا بتواند به آنتی ژن متصل شود. این آنتی بادی به آنزیم مرتبط است و در مرحله نهایی یک ماده حاوی آنزیم اضافه می شود. واکنش بعدی یک سیگنال قابل تشخیص را تولید می کند، اغلب تغییر رنگ در بسترمیباشد.
الایزا ELISA | معرفی تکنیک الایزا
انجام الایزا ELISA شامل حداقل یک آنتی بادی با خاصیت آنتی ژن خاص است.
نمونه با مقدار ناشناخته آنتی ژن بر روی یک پروتئین جامد (معمولا پلیت استریل میکروتتریک صفحه) یا غیر اختصاصی (از طریق جذب به سطح) یا به طور خاص (از طریق گرفتن یک آنتی بادی دیگر با خاصیت آنتی ژن مشابه در "ساندویچ" "ELISA")میتواند باشد.
پس از آنکه آنتی ژن بی حرکت می شود، آنتی بادی تشخیص اضافه می شود، که یک مجموعه با آنتی ژن را تشکیل می دهد. آنتی بادی شناسایی می تواند به یک آنزیم مرتبط شود یا خود آن را با یک آنتی بادی ثانویه تشخیص دهد که از طریق آنزیم بوسیله bioconjugation شدن مرتبط است.
بین هر مرحله، بشقاب به طور معمول با یک محلول شوینده خفیف برای حذف هر پروتئین یا آنتی بادی که به طور غیر اختصاصی محدود می شوند، شسته می شود. پس از مرحله نهایی شستشو، با اضافه کردن یک سوسپانسیون آنزیمی برای تولید یک سیگنال قابل رویت توسعه داده می شود، که نشان دهنده مقدار آنتی ژن در نمونه میباشد.
الایزا می تواند به جای روش های دقیق "ایمنی"، فرم های دیگر آزمایش های اتصال لیگان را انجام دهد، هرچند این نام "ایمنی" اصلی را به علت استفاده مشترک و تاریخ توسعه این روش انجام می دهد. این تکنیک اساسا نیازمند هر واکنش لیتیوب است که می تواند روی فاز جامد همراه با یک واکنش تشخیصی که به طور خاص متصل می شود و از یک آنزیم برای تولید یک سیگنال استفاده می شود که می تواند به درستی اندازه گیری شود
در بین شستن، تنها لیگاند و همتایان خاص آن باقی می ماند به طور خاص متصل یا "immunosorbed" توسط تعاملات آنتی ژن آنتی بادی به فاز جامد باقی می ماند، در حالی که اجزای غير اختصاصی و یا عدم اتصال از بین می روند. (تست الیزا)
این مطالب را نیز از دست ندهید :معرفی رشته شیمی دارویی
مرک آلمان
سیگما آلدریچ
با تشکر مجله دانش شیمی و تیم پایان نامه من
