برچسب- محیط کشت قارچ

محیط کشت قارچ ها تجزیه کننده رنگدانه

محیط کشت قارچ ها تجزیه کننده رنگدانه

محیط کشت قارچ ها تجزیه کننده رنگدانه :

مطالعه روی قارچ های پوسیدگی سفید

ارقام قارچ پوسیدگی سفید Phanerochaete chrysosporium و Pleurotus ostreatus (IE8) با رشد روی محیط کشت قارچ پیچیده آگار حاوی یکی از ۲۳ رنگ صنعتی مورد آزمایش نشان داد که P. ostreatus قادر به تجزیه ۱۲ از ۲۳ رنگ صنعتی در در ریسه خود بود در حالی که P. chrysosporium فقط ۵ رنگ را تجزیه کرد. این رنگهای صنعتی بر اساس پایداری آنها به طیف وسیعی از pH (pH 3–۱۱)، دما و مقاومت در برابر شرایط در میحط کشت در فلاسکهای مجزا انتخاب شدند. این ظرفیت تجزیه رنگ محیط کشت قارچ های تجزیه کننده با آنزیم های خارج سلولی همراه بود. با این حال عصاره خارج سلولی خام از P. ostreatus قادر به تجزیه تنها پنج رنگ بود که نشان می دهد که سایر مکانیسم های آنزیمی می توانند در تجزیه رنگ در آزمایشات داخل بدن نقش داشته باشند. عصاره خام خارج سلول از Trametes hispida که بر روی دانه جو دوسر رشد کرده است قادر به تجزیه رنگ محیط کشت رنگدانه دار در شرایط آزمایشگاهی ۱۱ از ۲۳ رنگ صنعتی بود.

آنزیم های تولید شده توسط قارچ های پوسیدگی سفید

با هدف یافتن فعالیت تجزیه رنگی بیشتر در محیط کشت و به دلیل آنزیم های لیگنینولیتیک خارج سلولی نشان داده شده است که با رشد در لایه های طبیعی لیگنین تحریک می شوند. Pleurotus ostreatus که به عنوان یک سویه شاخص از آزمایش های اولیه استفاده می شود در محیط های حاوی بسترهای مختلف لیگنین سلولز تولید شد. كشت جامدات با گندم كامل و جو در محیط کشت مایع در محيط كشت جامد مقايسه شد. این بسترهای طبیعی باعث تولید آنزیم های لیگنینولیتیک لاکاز و پراکسیداز منگنز شده و عصاره خارج سلولی خام ظرفیت تجزیه رنگ بالاتر رنگ نسبت به دست آمده از محیط پیچیده را نشان می دهد. P. ostreatus رشد یافته در جو دوسر بالاترین میزان تولید آنزیم حجمی و اختصاصی و فعالیت های رنگ آمیزی را نشان داد. میزان تولید فعالیت لاکاز در کشت جو دوسر ۷٫۵ برابر بیشتر از کشت مایع بود و فعالیت رنگ زدایی در برابرReactive blue از عصاره جو دوسر فاز جامد ۲۳ برابر بیشتر از ماده رویی محیط کشت متوسط پیچیده بود. هیچ فعالیت لیگنین پراکسیداز یا آریل الکل اکسیداز در هیچ یک از مایع رویی کشت P. ostreatus IE-8 مشاهده نشد.

مطالعه روی عصاره سلولی قارچ ها در تجزیه رنگدانه محیط کشت

پس از این تمام قارچها در تخمیر حالت محیط کشت جامد روی جو دوسر رشد کردند. عصاره های خارج سلولی برای تولید آنزیم و رنگ آمیزی مورد آزمایش قرار گرفتند. فعالیت های لیگنین پراکسیداز، منگنز پراکسیداز، لاکاز و الکل ویتریل الکل اکسیداز در عصاره های خام از ۱۶ گونه قارچی مشخص شد. تمام گونه های P. ostreatus در تجزیه ۵ رنگ آزمایش شده محیط کشت رنگدانه در سطوح مختلف فعال بودند اما T. hispida بالاترین فعالیت حجمی را نشان داد. سویه های Bjerkandera adusta پراکسیداز منگنز بالا اما فعالیت کم رنگ و لاکاز را کاهش دادند و Phryerochaete chrysosporium که به عنوان تولید کننده آنزیم های لیگنینولیتیک تحت رشد نیتروژن کم شناخته شده است هیچکدام از آنزیم ها را تولید نکرد و رنگها را در این شرایط رشد تجزیه نکردند. از چهار فعالیت آنزیمی مورد سنجش در این عصاره ها تنها به نظر می رسد که لاکاز با رنگ زدایی رنگ با همبستگی رنگ ارتباط دارد و Trametes hispida بالاترین تولید فعالیت لاکاز را نشان داد که مطابق با بالاترین فعالیت تجزیه رنگ است. هیچ فعالیت لیگنین پراکسیداز را نمی توان در هر یک از گونه های قارچ کشت شده در شرایط رشد روی محیط کشت قارچ های تجزیه کننده رنگدانه تشخیص داد.

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

 

ادامه مطلب ...

محیط کشت قارچ پوستی | خرید فروش محیط کشت قارچ پوستی

محیط کشت قارچ پوستی | خرید فروش محیط کشت قارچ پوستی

محیط کشت قارچ پوستی | خرید فروش محیط کشت قارچ پوستی :

در رابطه با کشت قارچ های بیماریزای پوست و نوع محیط کشت اگرچه یک روش استاندارد برای تست حساسیت پوستی وجود ندارد گزارش های متعددی وجود دارد که آزمایش حساسیت ضد میکروبی درماتوفیت ها را با استفاده از ماکروودایلوژ آگار یا ماکروودایلوشن آگار و تست های میکرودایلوشن و میکرودایلوشن انجام داده است. این گزارش ها به طور کلی ادامه روش های M27-A2 یا M38-A روی محیط کشت بوده اند. نتایج به دست آمده توسط برخی نویسندگان تنوع بسیار خوبی را نشان داده اند احتمالاً به دلیل عدم استاندارد سازی پارامترهای مختلفی که می توانند در تعیین MIC تأثیر بگذارند مانند روش تهیه تلقیح تلقیح و طول و دمای انکوباسیون. در یک مطالعه چند متری سطح بالایی از توافق داخل و کارگر برای تعیین MIC های انجام شده در محیط کشت RPMI در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد و با استفاده از یک دوره کشت ۴ روزه انجام شده است. برای آزمایش قارچ های رشته ای با برخی از سازگاری ها اول از همه از فیلترهای واتمن مدل ۴۰ برای جدا کردن قارچ از کنیدی استفاده می شود در نتیجه تلقیح همگن شامل تنها میکروکنیدی ها است. جداسازی این ساختارها یک گام مهم در تعیین MIC است زیرا احتمالاً حساسیت های ضد قارچی هیفا و میکروکنیدی ها متفاوت هستند.

دمای ایده آل
دمای ایده آل قرار دادن محیط کشت حاوی قارچ یعنی ۲۸ یا ۳۵ درجه سانتیگراد هنوز هم مورد بحث است. به خوبی شناخته شده است که اکثر گونه های درماتوفیت هنگامی که دمای کشت بین ۲۸ تا ۳۰ درجه سانتیگراد باشد رشد بهینه را نشان می دهد . با این حال درجه حرارت بالاتر مانند ۳۵ یا ۳۷ درجه سانتیگراد نیز پیشنهاد شده است. این پارامتر تأثیر معنی داری بر MIC برای مدت زمان کشت خاص در کلیه محیط کشت های آزمایش شده نشان نداده است.

مدت زمان کشت
تعدادی از نویسندگان برای آزمایش درماتوفیت ها روی محیط کشت قارچ پوستی زمان های مختلف کشت از ۳ تا ۲۰ روز را پیشنهاد داده اند. پس از ۴ روز T. rubrum رشد ضعیفی مشاهده شد. با این حال ۷ روز مشاهده شد که برای مشاهده قابل توجه رشد چاههای کنترل کافی است. طبق مطالعه دیگری ۴ روز کشت را برای مشاهده رشد چشمگیر در چاه های کنترل کافی است. تجزیه و تحلیل آماری نشان داد که افزایش زمان کشت روی محیط کشت نه تنها ۱۰ روز در مقایسه با ۷ روز باعث افزایش MIC های ۱ تا ۲ رقت با همان محیط بلکه ۷ روز نسبت به ۴ روز می شود. استثناء در مورد تربینافین وجود دارد جایی که زمان کشت بر MICs تأثیر نمی گذارد.

مقایسه محیط کشت های مختلف
همه محیط کشت های آزمایش شده (براث استاندارد RPMI ، MVM و SDB) نتایج آماری متفاوتی ارائه دادند (۰۵ / ۰P) بدون فاصله رقت به جز تربینیناف. MIC بزرگتر با RPMI بافر نسبت به سایر محیط های آزمایش شده بدست آمد. محیط پیشنهادی NCCLS رشد كافی همه ایزوله ها را تأیید می كند و تأیید می كند كه این محیط رشد قابل مشاهده مناسب قارچ های رشته ای از جمله درماتوفیت ها را ایجاد می كند. بین MVM و SDB ، اولین محیط کشت ی بود که در مقایسه با RPMI بیشتر شبیه بود. اگرچه MVM یک وسیله شیمیایی تعریف شده است که اغلب در تعیین MIC برای پاراکوکسییدوئید brasiliensis به روش macrodilution براث مورد استفاده قرار می گیرد، خواندن MIC در صفحات میکرودایلوشن سخت تر است زیرا شفافیت این محیط کشت در مقایسه با رنگ زرد رسانه های دیگر که در هنگام تجسم اشتباه گرفته می شود. گزارشی در مورد استفاده از محیط MVM در تعیین MIC برای قارچهای پوستی گزارش نشده است.
گزارش های کمی در مورد استفاده از محیط SDB برای تعیین MIC برای هر گونه قارچ از جمله درماتوفیت ها وجود دارد. ما SDB را آزمایش کردیم زیرا هزینه آن به میزان قابل توجهی پایین تر از سایر محیط های آزمایش شده ذکر شده در بالا است و در کلیه آزمایشگاه های قارچ شناسی استفاده می شود. با این حال محیط کشت SDB MIC پایین تر را نشان داد و در مقایسه با MVM و RPMI اختلاف معنی داری داشت (۰۵/۰ P).

روش مناسب برای کشت درماتوفیت ها
ارزیابی فعالیتهای آزمایشگاهی داروهای آزمایش شده روی محیط کشت نشان داد که تربینینین قوی ترین داروی فعال است. در نتیجه روش میکرودایلوشن برای درماتوفیتها مناسب و قابل تکرار است. نگهداری ایزوله ها در نمک استریل قبل از انتقال به سیب زمینی دکستروز آگار باعث افزایش تولید کنیدی می شود و استفاده از تلقیح حاوی تنها این ساختار را امکان پذیر می کند. به نظر می رسد که محیط کشت استاندارد RPMI یک وسیله آزمایش مناسب برای تعیین MICs برای تریکوفیتون روبروم است و داده های نویسندگان را که RPMI را برای آزمایش درماتوفیت ها توصیه می کنند تقویت می کند. در واقع دما به طور مداوم بر MIC اثر نمی گذارد و نشان می دهد که آزمایش ها می توانند در دمای ۲۸ یا ۳۵ درجه سانتیگراد انجام شوند. با این حال MIC های به دست آمده در زمان های مختلف نگهداری در محیط کشت باید با نتیجه بالینی در ارتباط باشند تا نشان دهند کدام زمان قابلیت اطمینان بهتری دارد.

 

 

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

ادامه مطلب ...

محیط کشت pH چیست؟ | میکروارگانیسم های خاص

محیط کشت pH

محیط کشت pH رشد میکروب ها را تحت تأثیر قرار می دهد. هر ارگانیسم pH بهینه دارد که در آن بهترین رشد را می کند. تغییر این مقدار pH منجر به رشد نامطلوب می شود. در اکثر باکتریها با نزدیک شدن به مقدار بهینه “pH” و کاهش مرتب آن در میزان و سرعت رشد تاثیر دارند در حالی که شروع به تغییر از نقطه مطلوب می کند. هر گونه میکروارگانیسم براساس دامنه مشخصه ای از مقادیر pH (و در نتیجه محیط کشت) خود که در آن رشد می کند و به بهترین شکل تولید می شود به سه نوع تقسیم می شود. اگرچه می دانیم که دامنه pH کلی برای اکثر باکتری ها ۵ تا ۹ (بهینه ۷) است اما می توانند اسیدوفیل (دامنه pH از ۰ تا ۵/۵)، نوتروفیل (دامنه pH از ۵٫۵ تا ۸٫۰) و آلکالوفیلیک (دامنه pH از ۸٫۵ تا ۱۱٫۵) باشند.

میکروارگانیسم های خاص
این میکروارگانیسم ها دقیقاً مانند سایر ارگانیسم ها به محیط کشت pH فیزیولوژیکی داخل سلولهای خود نیز نیاز دارند. توانایی زنده ماندن در pH شدید یا زیاد یا پایین به توانایی آنها در خنثی کردن اختلاف محیط با pH فیزیولوژیکی بستگی دارد. میکروارگانیسم هایی مانند Helicobacter pylori در شرایط بسیار اسیدی در معده یافت می شوند بنابراین برای حفظ اختلافات محیطی خود اورهاز تولید می کنند. اوزهاز آنزیمی است که اوره را تخریب می کند و اسیدیته را کاهش می دهد. باکتریهای دیگری نیز وجود دارند که برای زندگی در pH قلیایی به عنوان مثال در نزدیکی افراد سیگاری، چشمه های زمین شناسی مواد معدنی که مواد معدنی بسیار قلیایی را به اقیانوس شلیک می کنند تخصص دارند. تغییر در شرایط اسیدی یا قلیایی محیط با تغییر رنگ با استفاده از شاخص های pH نشان داده می شود. آنها در محیط کشت هایی برای تمایز بین گروه های مختلف میکروارگانیسم ها بر اساس خاصیت تولید اسید یا قلیایی مورد استفاده قرار می گیرند. به عنوان مثال ائوزین و متیلن آبی، برومو تیمول آبی، اسیدفوچسین، فنل قرمز و غیره.

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

ادامه مطلب ...

فروش محیط کشت قارچ | خرید محیط کشت قارچ

فروش محیط کشت قارچ | خرید محیط کشت قارچ

فروش محیط کشت قارچ | خرید محیط کشت قارچ :

محیط کشت های حاوی منبع کربوهیدرات زیاد، منبع نیتروژن برای رشد قارچ ها در pH 5 تا ۶ و دامنه دما از ۱۵ تا ۳۷ درجه سانتیگراد برای کشت قارچ ها مورد نیاز است. دو نوع کلی از محیط کشت قارچ وجود دارد: طبیعی و مصنوعی. محیط های طبیعی از بسترهای طبیعی مانند ساقه های علفی یا چوبی، دانه ها، برگها، آرد ذرت، جوانه گندم و جو دوسر و غیره تشکیل می شوند. محیط های طبیعی معمولاً آماده سازی آسان دارند اما میزان ترکیبات داخل آنها ناشناخته است. برخی از نمونه ها عبارتند از: آگار آرد ذرت، آگار دکستروز سیب زمینی، آگار آب میوه و آگار سرگین.

محیط کشت مصنوعی

از طرف دیگر محیط کشت قارچ های مصنوعی حاوی ترکیبات شناخته شده ای هستند. این نوع محیط ها حاوی مقادیر مشخصی از کربوهیدرات، ازت و منابع ویتامین هستند. محیط زاپک داکس ، گلوکز-آسپاراگنین و نوروسپورا کراسا در این گروه قرار می گیرند. محیط های عمومی که معمولاً برای کشت قارچ مورد استفاده قرار می گیرد آگار دکستروز (SDA) است که با pH اسیدی (۵٫۶) از نظر تغذیه ای ضعیف است. محیط های انتخابی مانند محیط کشت مخمر و محیط تست درماتوفیت برای پاتوژن های قارچی مانند Cryptococcus neoformans و dermatophytes بسیار مهم هستند. آگار ترکیب شده با برنج، کازئین و سایر مواد مغذی مانند آگار ذرت با توئین ۸۰ برای تمایز گونه های کاندیدا و گونه های تریکوفیتان استفاده می شود. آگار دکستروز سیب زمینی برای تشکیل کنیدی و رشد رنگدانه تریکوفیتان روبروم استفاده می شود. بیشتر محیط کشت قارچ های مورد استفاده در آزمایشگاه در مقیاس بزرگ مقرون به صرفه نیستند بنابراین صنعتگران شروع به استفاده از چندین منبع ارزان کربن ارزان قیمت کرده اند.

 

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

ادامه مطلب ...

محیط کشت پوتیتو دکستروز تاثیر مس آن روی میکروارگانیسم

محیط کشت پوتیتو دکستروز تاثیر مس آن روی میکروارگانیسم

اهمیت انتخاب محیط کشت مناسب جداسازی و شناسایی میکروارگانیسم ها

کاربرد محیط کشت پوتیتو دکستروز در شناسایی و جداسازی قارچ ها بسیار زیاد است. شناسایی قارچ های کشت شده از زیرلایه های طبیعی (خاک، مواد گیاهی و غیره) بر اساس شناسایی ساختارهای تولید مثل جنسی و جنسی است. تشکیل رنگدانه های موجود روی و داخل اسپورها، اسپوروفورها و میسلیوم ها یا مواد ترشح شده در محیط نیز کمک مهمی در شناسایی است. انتخاب واسطه ای که برای جداسازی و شناسایی میکروفون ها استفاده می شود نه تنها روی گروه های قارچ های جدا شده بلکه بر سهولت شناسایی آنها تأثیر می گذارد.

مواد داخل محیط کشت پوتیتو دکستروز

با این حال اکثر قارچشناسان به طور مرتب از طیف وسیعی از محیط های کشت مانند محیط کشت پوتیتو دکستروز تاثیر مس (PDA) استفاده می کنند که مورد نام برده شده بهترین و شناخته شده ترین بوده و پرکاربرد می باشد. PDA حاوی ۵/۱ درصد آگار، ۲ درصد گلوکز است که از آن نیتروژن، فسفر، ویتامین ها و ریز مغذی ها از عصاره کاملاً فیلتر شده سیب زمینی های اصلاح شده حاصل می شود. نسبت بالای مواد مغذی کربن محی کشت پوتیتو دکستروز آگار PDA باعث رشد مناسب و مهمتر از آن اسپور سازی و رنگدانه برای طیف گسترده ای از گونه های قارچی می شود.

 محیط کشت پوتیتو دکستروز و تاثیر مس آن

مس یک عنصر ریز مغذی برای رشد قارچ ها است و به عنوان کوفاکتور برای طیف وسیعی از اکسیدازها و اکسیژنازها از جمله لاکها و سایر اکسیدازهای “مس-آبی” که در رنگدانه ها و کاتابولیسم ترکیبات معطر مانند لیگنین نقش دارند بازی می کند. اگرچه توجه بیشتری به مکانیسم های مقاومت مس در قارچ ها در رابطه با استفاده از مس به عنوان یک قارچ کش کشاورزی یا در پاسخ به آلودگی فلزات سنگین شده است، اثرات کمبود مس در رشد و توسعه قارچ نیز مورد توجه قرار گرفته است. به عنوان مثال تشکیل رنگدانه کنیدی های Aspergillus niger تحت تأثیر سطح مس در محیط، با رنگدانه معیوب (گوزن، زرد یا قارچ قهوه ای) در غلظت های پایین مس (۵-۵۰ ngmL 1) است در حالی که رنگدانه طبیعی (سیاه) لازم است. هم چنین در مثالی دیگر تشکیل ملانین توسط Gaeumannomyces graminis با افزودن مقادیر کم (۱۰ میلی متر = ۶۷۰ ngmL 1) مس افزایش می یابد.

پودرهای تجاری محیط کشت PDA

اگرچه محیط کشت پوتیتو دکستروز روی میکروارگانیسم براث (PDB) و PDA در تحقیقات میکروبیولوژیکی بسیار مورد استفاده قرار می گیرند تهیه آنها از مواد اولیه بسیار خسته کننده است. در حال حاضر بسیاری از آزمایشگاه ها از پودرهای تجاری پودری استفاده می کنند که حاوی عصاره سیب زمینی لیوفیلیزه مخلوط شده با گلوکز و (فقط برای PDA) آگار است.

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

ادامه مطلب ...

محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارچ

محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارچ

محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارچ :

محتوای مس PDA های تجاری مختلف
محیط کشت پوتیتو دکستروز می تواند بر رنگدانه های کنیدی های سبز رنگ از کلنی های Aspergillus nidulans کشت شده روی این محیط کشت تاثیرگذارد. کمبود مس می تواند باعث کاهش تولید رنگدانه در این گونه قارچی شود. هیچ ارتباطی بین تولیدکنندگان یا محصولات خاص وجود ندارد و به احتمال زیاد تغییر در محصولات PDA مربوط به منبع سیب زمینی به جای هر نوع مصنوعی از فرایند تولید است.

تأثیر سطح مس بر رنگدانه کنیدی ها در A. nidulans
در بررسی تاثیر محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارج، در A. nidulans مرحله آخر در شکل گیری رنگدانه کنیدی شامل یک لاکاز اختصاصی کنیدی (محصول ژن yA) است که یک پیش ماده زرد را به رنگدانه ملانین سبز تیره تبدیل می کند و به عنوان یک کوفاکتور به مس نیاز دارد. به نظر می رسد لاكاز كیديال خالص از كشت A. nidulans كه در محيط های حاوی o64 ngmL 1 (1 mM) مس كاهش یافته است باعث كاهش فعالیت تولید رنگدانه می شود. هم چنین گونه های مختلف آسپرژیلوس روی انواع مختلف محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار در تولید رنگدانه متفاوت بودند. اثر کمبود مس در جهش ygA برجسته تر بود و تشکیل ماده مخدر رنگی شده تا حدی در گونه هایی که از همبستگی طبیعی نوع وحشی پشتیبانی می کنند تشکیل می شود. افزودن مقادیر کم مس به این محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار تولید نرمال رنگدانه شد با این که جهش ygA نیاز به مکمل بیشتر (۲۰۰ ngmLL 1) برای رنگدانه طبیعی دارد. در کل ۴۱۰۰ ngmLL مس برای دستیابی به رنگدانه کامل جهش ygA مورد نیاز است.

تاثیر مرغوبیت محیط کشت PDA بر تولید کنیدی
در محیط کشت پوتیتو دکستروز حاوی ۲۶ ngmL 1 مس ترکیب نوع وحشی به حدی کاهش یافت که رنگدانه خاکستری کونیدیوفورهای زیرین قابل مشاهده بود بنابراین تعداد کنیدی هاي تشکيل شده توسط هر دو نوع وحشي و جدايه هاي جهشي ygA نيز توسط سطح مس مختلف تحت تاثیر قرار گرفتند
تفاوت در رنگدانه میکروب های دیگر در PDA
روی محیط کشت پوتیتو دکستروز های مختلف طیف وسیعی از میکروفون ها از جمله چندین گونه که در آن الگوهای رنگی مشخص برای شناسایی مورفولوژیکی مهم هستند کشت داده شدند. تفاوت چشمگیری در رنگدانه در مقایسه با همان کشت مکمل با مس اضافی مشاهده شد. هم چنین کشت در T. harzianum ، F. culmorum ، S. atra و C. herbarum در محیط کشت پوتیتو دکستروز های دارای محتوای کم مس نیز برای M. grisea ،B. cinerea و چند گونه Penicillium باعث تشکیل رنگدانه های آتیپیک شد.

تأثیر میزان مس در محیط کشت PDA بر فعالیت لاکاز
در بررسی تاثیر محیط کشت پوتیتو دکستروز باید بدانیم که مراحل پایانی شکل گیری رنگدانه ها در بسیاری از قارچ ها به عنوان مثال Fusarium و Trichoderma شامل لاکازها است. برای کشف این احتمال که نقص رنگدانه ای که در بالا توضیح داده شدنتیجه کاهش فعالیت فنلوکسیداز است، به دلیل کاهش در دسترس بودن کوفاکتور مس فعالیت لاکاز اندازه گیری شد. فعالیت لاکاز برای محیط کشت پوتیتو دکستروزی که حاوی ۳۰ یا ۲۰۰ ngmL 1 مس اضافی بود در مقایسه با PDA معمولی به طور قابل توجهی بالاتر بود. در فعالیت لاکاز بین گونه های قارچی و برخی از نشانه ها وجود دارد که فعالیت لاکاز با تولید کنیدی همراه است و در نتیجه در سوپرناتانتها که در فعالیت لاکاز نقش دارند تغییرات چشمگیری وجود داشت. با وجود این واقعیت که رنگدانه ها تفاوت قابل توجهی با هم داشتند. با این حال افزودن مس به عصاره کنیدیایی سویه های جهش یافته ygA از A. nidulans باعث افزایش دو برابر در فعالیت لاکاز شد و این نشان می دهد که فعالیت کم این سویه در تولید رنگدانه به دلیل عدم وجود کوفاکتور مورد نیاز می باشد.

بهبود ژن های معیوب قارچی با افزودن مس به محیط کشت پی دی ای
اعتقاد بر این است که رنگدانه کنیدیایی ضعیف جهش ygA روی محیط کشت پوتیتو دکستروز به دلیل کمبود جذب مس است. مقایسه نقشه پیوند کلاسیک و توالی ژنوم A. nidulans کاملاً نشان می دهد که مکان ygA با ژن به اصطلاح ژن AN3624.2 مطابقت دارد. دنباله پپتید قلمداد از این ژن شباهت بالایی را نشان می دهد (هویت ۴۶۰٪) با چندین پروتئین قارچی دیگر که همه حاوی دامنه های یونیزان مس و سایتهای اتصال ATP هستند. بهترين مطالعه اين ژنها ژن clap1 در Colletotrichum lindemuthianum است که به عنوان ATPase حمل کننده مس ناميده شده است. با وجود جهش در اين مکان که رنگدانه هاي اسپور معيوب دارد با افزودن ۳۲۰۰ ngmL 1 (50 mM) مس اصلاح خواهد شد.

 

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

ادامه مطلب ...

محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار | خرید و فروش محیط کشت پوتیتو دکستروز

محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار | خرید و فروش محیط کشت پوتیتو دکستروز

محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار | خرید و فروش محیط کشت پوتیتو دکستروز :

میزان مس در عصاره نمونه های مختلف سیب زمینی
اکثر قارچ شناسان اکنون از محیط کشت پوتیتو دکستروز تجاری PDA استفاده می کنند که عصاره سیب زمینی خشک شده و پودر شده بوده که با گلوکز و آگار مخلوط می شود. دستور العمل های قدیمی تر برای PDA طیف وسیعی از روش های آماده سازی محیط کشت را نشان می دهد به عنوان مثال برخی استفاده از سیب زمینی های سفید پوست قدیمی (برای تولید محیط کشت پوتیتو دکستروز عناصر را که به طور اتوکلاو شده با آب قبل از تیره شدن تهیه شده اند توصیه می کنند در حالی که برخی دیگر توصیه می کنند که سیب زمینی ها جدید باشند. برخی محققان نظرشان این است که سیب زمینی ها باید خرد شوند (پوست کنده نشوند).
ارجهیت سیب زمینی های ارگانیک در مقایسه با معمولی در کیفیت
همچنین شواهد حکایتی وجود دارد که نشان می دهد محیط کشت پوتیتو دکستروز باید با استفاده از سیب زمینی های زراعی “ارگانیک” ساخته شود. سطح مس در سیب زمینی های زراعی “ارگانیک” بالاتر از غده های زیر کشت معمولی است. تجزیه و تحلیل عصاره های فیلتر شده از ۲۷ نمونه غده تهیه شده طبق دستورالعمل استاندارد برای محیط کشت پوتیتو دکستروز میکرو شش برابر غلظت مس را نشان داد و میزان مس به طور قابل توجهی بالاتر از عصاره غده های رشد یافته تحت رژیم های مدیریت ارگانیک (مکمل) بود. با مقایسه سطح مس در این عصاره سیب زمینی تخمین زده می شود که میزان مس در PDA “خانگی” از ۳۳ تا ۱۱۳ ngmL 1 است.
تاثیر سم های استفاده شده برای کشت سیب زمینی روی محیط کشت PDA
سم ها می توانند تاثیر مستقیم بر کیفیت محیط کشت پوتیتو دکستروز بگذارند. استفاده از مخلوط بوردو و سایر قارچ کش های مبتنی بر مس برای کنترل پوسیدگی در اواخر فصل کشت سیب زمینی از دهه ۱۸۸۰ گسترده بود تا زمان ظهور قارچ کش های ارگانیک مصنوعی در دهه ۱۹۳۰ دوره ای که استفاده از محیط PDA گسترده شد ادامه یافت. با این حال مخلوط بوردو هنوز هم برای کنترل بیماری های سیب زمینی در محصولات زراعی ارگانیک مورد استفاده قرار می گیرد و این امکان وجود دارد که این مسئله باعث افزایش سطح مس در این غده ها شود.
نتیجه گیری
این واقعیت که سطح مس (کوفاکتور تشکیل رنگدانه در محیط کشت پوتیتو دکستروز) می تواند به طور قابل ملاحظه ای بین دسته های مختلف سیب زمینی متفاوت باشد و اینکه چنین تغییراتی می تواند باعث ایجاد تغییرات قابل توجه در رنگدانه های میکروبی و میسلیوم در کلنی های قارچی شود که روی دسته های مختلف PDA تهیه شده از نظر تجاری و ‘ساخته شده از خانه’ ایجاد می شود باعث نگرانی متخصصان می شود. به خصوص اگر تنوع دسته ای باعث ایجاد تفاوت های مورفولوژیکی در کشت های خاص قارچ شود. سایر فرایندهای متابولیک ثانویه به ویژه تولید مایکوتوکسین تحت تأثیر غلظت عناصر کمیاب در کشت ها قرار می گیرند.
بالا بردن کیفیت محیط کشت پی دی ای با افزودن سولفات مس
توصيه مي شود هنگام ساختن محیط کشت پوتیتو دکستروز عناصر میکرو مقدار كمي سولفات مس (۱۰۰۰ ngmL 1؛ حدود ۱۵ ميلي مولار CuSO4 5H2O) اضافه شود. از طرف دیگر افزودن محلول عناصر کمیاب Hunter (Aspergillus) حاوی ۴۰۰۰ ngmL 1 مس یا یک فرمولاسیون مشابه علاوه بر این از این کمبودهای معدنی جلوگیری می کند. علاوه بر این ممکن است از تنوع دسته ای مس یا عناصر کمیاب در بسیاری از کشت های طبیعی طولانی مدت و نامشخص که هنوز هم در کاربردهای گسترده ای دارند با استفاده از چنین اقدامات احتیاطی ساده ای جلوگیری شود.

 

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

ادامه مطلب ...

فروش محیط کشت باکتری | خرید محیط کشت باکتری

فروش محیط کشت باکتری | خرید محیط کشت باکتری

فروش محیط کشت باکتری | خرید محیط کشت باکتری :

 

محیط کشت باکتری

محیط کشت باکتری می توانند به یک محیط ساده، مصنوعی یا پیچیده تبدیل شوند جایی که در میزان و نوع مواد محتوی متفاوت هستند. کشت های ساده رشد باکتری های بدون چربی را تسهیل می کنند و ترکیبات شیمیایی دقیق کشت های ساده شناخته می شوند. محیط مصنوعی از حداقل مواد تشکیل دهنده مورد نیاز برای رشد میکروارگانیسم ها به عنوان مثال محیط کشت باکتری دیویس و منینگولی تشکیل شده است.

با این حال در کشت های پیچیده ترکیب شیمیایی دقیق مشخص نیست به عنوان مثال در محیط مایع سویا تریپتیک. محتویات باکتریایی می توانند از قوام مختلفی برخوردار باشند: محیط جامد مواد مغذی آگار، محیط نیمه جامد استوارت و محیط مایع مواد مغذی.

 

نقش محیط کشت در شناسایی میکروارگانیسم ها

محیط کشت باکتری در کشت شناسایی میکروارگانیسم ها بسیار با اهمیت می باشند. کشت خالص معمولاً برای انجام تحقیقات در مورد باکتریهای خاص مهم است و برای همین انتخاب ماده مهم برای جداسازی و رشد آنها مهم است. بنابراین محیط های انتخابی و افتراقی مختلفی تدوین شده اند که دارای اجزای مختلفی هستند که یک گروه از ارگانیسم ها را از گروه دیگر متمایز می کنند.

به عنوان مثال مک کونکی آگار، بلاد آگار و … .. محیط کشت باکتری های جایگزین مختلف با استفاده از مؤلفه های خاص برای کمک به کشت بیشتر انتخابی باکتریها تهیه شده است به عنوان مثال محیط دورست و محیط پترگنانی برای کشت مایکوباکتری ها استفاده می شود. محیط دورست شامل سفید و زرده تخم مرغ و محلول کلرید سدیم است. با این وجود علاوه بر مایکوباکتری ها کشت های مبتنی بر تخم مرغ نیز برای رشد برخی باکتری های بیماری زای دیگر مانند استرپتوکوک پنومونی، نایسریا مننژیتیدها و آنفلوآنزای آنفلوانزا (نوع b) استفاده می شوند. از نشاسته ها و پروتئین های جایگزین مانند نخود گاو، گرم سبز و گرم سیاه نیز در محیط کشت باکتری برای کاهش هزینه های میکروبی استفاده شده است.

 

مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)

09357007743 : تلفن سفارش و خرید

ادامه مطلب ...