محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارچ
محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارچ
محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارچ :
محتوای مس PDA های تجاری مختلف
محیط کشت پوتیتو دکستروز می تواند بر رنگدانه های کنیدی های سبز رنگ از کلنی های Aspergillus nidulans کشت شده روی این محیط کشت تاثیرگذارد. کمبود مس می تواند باعث کاهش تولید رنگدانه در این گونه قارچی شود. هیچ ارتباطی بین تولیدکنندگان یا محصولات خاص وجود ندارد و به احتمال زیاد تغییر در محصولات PDA مربوط به منبع سیب زمینی به جای هر نوع مصنوعی از فرایند تولید است.
تأثیر سطح مس بر رنگدانه کنیدی ها در A. nidulans
در بررسی تاثیر محیط کشت پوتیتو دکستروز رنگدانه قارج، در A. nidulans مرحله آخر در شکل گیری رنگدانه کنیدی شامل یک لاکاز اختصاصی کنیدی (محصول ژن yA) است که یک پیش ماده زرد را به رنگدانه ملانین سبز تیره تبدیل می کند و به عنوان یک کوفاکتور به مس نیاز دارد. به نظر می رسد لاكاز كیديال خالص از كشت A. nidulans كه در محيط های حاوی o64 ngmL 1 (1 mM) مس كاهش یافته است باعث كاهش فعالیت تولید رنگدانه می شود. هم چنین گونه های مختلف آسپرژیلوس روی انواع مختلف محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار در تولید رنگدانه متفاوت بودند. اثر کمبود مس در جهش ygA برجسته تر بود و تشکیل ماده مخدر رنگی شده تا حدی در گونه هایی که از همبستگی طبیعی نوع وحشی پشتیبانی می کنند تشکیل می شود. افزودن مقادیر کم مس به این محیط کشت پوتیتو دکستروز آگار تولید نرمال رنگدانه شد با این که جهش ygA نیاز به مکمل بیشتر (۲۰۰ ngmLL 1) برای رنگدانه طبیعی دارد. در کل ۴۱۰۰ ngmLL مس برای دستیابی به رنگدانه کامل جهش ygA مورد نیاز است.
تاثیر مرغوبیت محیط کشت PDA بر تولید کنیدی
در محیط کشت پوتیتو دکستروز حاوی ۲۶ ngmL 1 مس ترکیب نوع وحشی به حدی کاهش یافت که رنگدانه خاکستری کونیدیوفورهای زیرین قابل مشاهده بود بنابراین تعداد کنیدی هاي تشکيل شده توسط هر دو نوع وحشي و جدايه هاي جهشي ygA نيز توسط سطح مس مختلف تحت تاثیر قرار گرفتند
تفاوت در رنگدانه میکروب های دیگر در PDA
روی محیط کشت پوتیتو دکستروز های مختلف طیف وسیعی از میکروفون ها از جمله چندین گونه که در آن الگوهای رنگی مشخص برای شناسایی مورفولوژیکی مهم هستند کشت داده شدند. تفاوت چشمگیری در رنگدانه در مقایسه با همان کشت مکمل با مس اضافی مشاهده شد. هم چنین کشت در T. harzianum ، F. culmorum ، S. atra و C. herbarum در محیط کشت پوتیتو دکستروز های دارای محتوای کم مس نیز برای M. grisea ،B. cinerea و چند گونه Penicillium باعث تشکیل رنگدانه های آتیپیک شد.
تأثیر میزان مس در محیط کشت PDA بر فعالیت لاکاز
در بررسی تاثیر محیط کشت پوتیتو دکستروز باید بدانیم که مراحل پایانی شکل گیری رنگدانه ها در بسیاری از قارچ ها به عنوان مثال Fusarium و Trichoderma شامل لاکازها است. برای کشف این احتمال که نقص رنگدانه ای که در بالا توضیح داده شدنتیجه کاهش فعالیت فنلوکسیداز است، به دلیل کاهش در دسترس بودن کوفاکتور مس فعالیت لاکاز اندازه گیری شد. فعالیت لاکاز برای محیط کشت پوتیتو دکستروزی که حاوی ۳۰ یا ۲۰۰ ngmL 1 مس اضافی بود در مقایسه با PDA معمولی به طور قابل توجهی بالاتر بود. در فعالیت لاکاز بین گونه های قارچی و برخی از نشانه ها وجود دارد که فعالیت لاکاز با تولید کنیدی همراه است و در نتیجه در سوپرناتانتها که در فعالیت لاکاز نقش دارند تغییرات چشمگیری وجود داشت. با وجود این واقعیت که رنگدانه ها تفاوت قابل توجهی با هم داشتند. با این حال افزودن مس به عصاره کنیدیایی سویه های جهش یافته ygA از A. nidulans باعث افزایش دو برابر در فعالیت لاکاز شد و این نشان می دهد که فعالیت کم این سویه در تولید رنگدانه به دلیل عدم وجود کوفاکتور مورد نیاز می باشد.
بهبود ژن های معیوب قارچی با افزودن مس به محیط کشت پی دی ای
اعتقاد بر این است که رنگدانه کنیدیایی ضعیف جهش ygA روی محیط کشت پوتیتو دکستروز به دلیل کمبود جذب مس است. مقایسه نقشه پیوند کلاسیک و توالی ژنوم A. nidulans کاملاً نشان می دهد که مکان ygA با ژن به اصطلاح ژن AN3624.2 مطابقت دارد. دنباله پپتید قلمداد از این ژن شباهت بالایی را نشان می دهد (هویت ۴۶۰٪) با چندین پروتئین قارچی دیگر که همه حاوی دامنه های یونیزان مس و سایتهای اتصال ATP هستند. بهترين مطالعه اين ژنها ژن clap1 در Colletotrichum lindemuthianum است که به عنوان ATPase حمل کننده مس ناميده شده است. با وجود جهش در اين مکان که رنگدانه هاي اسپور معيوب دارد با افزودن ۳۲۰۰ ngmL 1 (50 mM) مس اصلاح خواهد شد.
مرکز فروش مواد شیمیایی و آزمایشگاهی، فروش کیت تحقیقاتی و تجهیزات آزمایشگاهی از معتبر ترین برندهای دنیا از جمله سیگما آلدریچ، مرک آلمان، ترموفیشر، پرومگا و … (خرید مواد شیمیایی و آزمایشگاهی اورجینال)
09357007743 : تلفن سفارش و خرید
دیدگاهتان را بنویسید